細胞培養中會(huì )遇到的各種問(wèn)題解答

     在培養細胞的過(guò)程中，或許你會(huì )有一系列的問(wèn)題想要問(wèn)。那么以下是為大家整理的一些關(guān)于細胞的常見(jiàn)問(wèn)題解答。

一、細胞成長(cháng)曲線(xiàn)測守時(shí)為什么要做重復孔？

答：測定細胞成長(cháng)曲線(xiàn)細胞計數時(shí)挑選 3 個(gè)復孔，每孔分別計三次，取其平均值，目的是減小操作差錯。

二、為什么制作的細胞成長(cháng)曲線(xiàn)沒(méi)有到達平臺期？

答：可能有以下原因：一是細胞接種密度過(guò)低；二是細胞培育時(shí)刻過(guò)短；三是細胞成長(cháng)狀況欠好，使其不能正常增殖。

三、怎么挑選細胞接種數？

答：可根據細胞傳代培育過(guò)程中接種數及細胞成長(cháng)周期進(jìn)行核算，細胞接種數因細胞的不同而不同。

四、細胞計數時(shí)為什么要用臺盼藍染色？

答：參加臺盼藍后，活細胞不上色，臺盼藍上色的細胞呈深藍色，是不健康或已的細胞，不能計數。

五、測定細胞成長(cháng)曲線(xiàn)的含義是什么？

答：細胞成長(cháng)曲線(xiàn)是測定細胞肯定成長(cháng)數的常用辦法，也是斷定細胞生機的重要目標，是培育細胞生物學(xué)特性的基本參數。由于細胞太小，無(wú)法測單個(gè)細胞的成長(cháng)狀況，所以測細胞集體的成長(cháng)曲線(xiàn)。

六、細胞成長(cháng)曲線(xiàn)測定周期是幾天？

答：一般是一個(gè)星期。

七、細胞成長(cháng)曲線(xiàn)還有其他辦法制作嗎？

答：當然有。我們說(shuō)到zui多的是直接計數的辦法，除此以外還有相對計數的辦法，該類(lèi)辦法首先要制作規范曲線(xiàn)，標定細胞數和某個(gè)變量的函數，然后我們只需要測定每天這個(gè)變量的值便能夠核算出細胞數。常用的是 MTT、CCK8 等比色的辦法。

八、為什么細胞計數多天，細胞數沒(méi)有添加反而削減？

答：一般細胞傳代后，會(huì )有一個(gè)成長(cháng)緩慢的潛伏期，細胞不增殖，而細胞會(huì )有正常的消失，故細胞數不添加反而削減。